ELISA - Ensayo Inmunoabsorbente Ligado A Enzimas: Transcripción

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ELISA - Ensayo Inmunoabsorbente Ligado A Enzimas: Transcripción
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Vídeo: Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) | Iniciación científca #21 2024, Marzo
Anonim

El método de diagnóstico (ELISA) es informativo y no demasiado caro, por lo que muchos laboratorios ofrecen a sus clientes este método (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas). El estudio se lleva a cabo con el estómago vacío, se extrae sangre para análisis de la vena cubital del paciente. Es aconsejable no fumar ni beber alcohol antes del ELISA.

El contenido del artículo:

  • 1 ¿Qué es un análisis de sangre ELISA?
  • 2 ¿Qué son las inmunoglobulinas?
  • 3 Cómo se realiza el ELISA de sangre
  • 4 Inmunoensayo contra parásitos por ELISA
  • 5 Cómo se usa el ELISA
  • 6 Pruebas para análisis inmunológico de sangre por ELISA
  • 7 Alcance del análisis inmunológico de sangre por ELISA
  • 8 Indicaciones de uso y enfermedades detectadas por ELISA
  • 9 Ventajas del método ELISA
  • 10 Desventajas del método ELISA
  • 11 Posibles resultados de ELISA

¿Qué es un análisis de sangre ELISA?

Entre los métodos de análisis de sangre, que permiten evaluar la capacidad del organismo para resistir enfermedades infecciosas y mostrar la fase de la enfermedad, el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) ocupa un lugar importante. La realización de este estudio permite evaluar de manera integral la actividad de la función protectora de la sangre e identificar el estado de inmunodeficiencia en patologías infecciosas, así como enfermedades de la sangre, procesos autoinmunes, problemas hormonales.

Se trata de un estudio de laboratorio que permite determinar la presencia de anticuerpos específicos (factores protectores de la sangre de naturaleza proteica) frente a determinados antígenos (agentes patógenos). Entre los anticuerpos, las inmunoglobulinas, que pueden existir en forma de inmunocomplejos, son de suma importancia.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Las inmunoglobulinas se producen como resultado de reacciones neurohumorales complejas de la inmunidad humana, que surgen como respuesta a la introducción de antígenos extraños. Para cada tipo de agente patógeno, se producen sus propios anticuerpos específicos. Actúan "uniendo" un antígeno o un microorganismo patológico, formando un compuesto complejo "antígeno-anticuerpo" con posterior neutralización, lisis enzimática, reacciones de fagocitosis y retirada del organismo. Es por la presencia de ciertos complejos que el método ELISA determina el tipo de patógeno o sustancia nociva presente en el paciente.

Debido al bajo precio y al uso de sangre como biomaterial, el método se utiliza como método de detección. Por ejemplo, si se sospecha de parasitosis, los pacientes donan sangre para determinar anticuerpos contra lombrices intestinales, lamblia, etc. Si el resultado es positivo, entonces no debe comenzar a tratar los parásitos de inmediato; es necesario comparar el cuadro clínico, los resultados de ELISA y, posiblemente, los resultados de otros métodos de examen.

Vale la pena recordar que después del curso completo del tratamiento, los anticuerpos pueden permanecer en nuestro cuerpo durante mucho tiempo, incluso después de que la infección haya abandonado nuestro cuerpo, es decir, permanece la llamada "cicatriz serológica". Por ejemplo, hay miles de estrellas en el cielo nocturno. Muchas de estas estrellas han muerto hace mucho tiempo, pero su luz ha estado brillando hasta ahora, durante siglos. De hecho, solo vemos un rastro de estrellas. Hay luz, pero la estrella se ha ido hace tiempo.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Pero si no hay luz, esto no significa que la estrella no estuviera allí. Lo mismo ocurre con los anticuerpos. Su presencia no garantiza la presencia del agente infeccioso deseado en el cuerpo. La ausencia de anticuerpos no significa que no haya infección. Si el resultado del análisis por ELISA es positivo, esto significa que debe buscar una infección con métodos más específicos y costosos: PCR, cultivos bacteriológicos. Es posible un resultado falso positivo si varios microbios tienen una estructura antigénica similar, entonces se producirán anticuerpos "similares" para diferentes microbios.

¿Qué son las inmunoglobulinas?

Se han descubierto y estudiado 5 clases principales de inmunoglobulinas: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. el papel del resto aún no se ha dilucidado por completo y se encuentra en la etapa de investigación científica.

La principal tarea de la inmunoglobulina A (IgA) son las funciones protectoras de las membranas mucosas del tracto respiratorio, el tracto gastrointestinal y el sistema urinario. Con un inicio agudo de la enfermedad, es imposible identificarlos. Estos complejos protectores aparecen solo a partir de las 2 semanas del inicio de la enfermedad, a veces más tarde. La mayor parte de la inmunoglobulina A se concentra en los tejidos mucosos. Aproximadamente el 80%. El resto de anticuerpos circula en la sangre.

La función principal es neutralizar y destruir microorganismos. Una vez que las manifestaciones agudas de la enfermedad han remitido, la cantidad de estas inmunoglobulinas comienza a disminuir y desaparece por completo hasta 8 semanas después del inicio de la enfermedad. Si se detecta IgA en una fecha posterior, esto indica la cronización del proceso.

Los principales y primeros marcadores de la fase aguda de la patología en desarrollo son las inmunoglobulinas de clase M (IgM). Se encuentran en el quinto día de la aparición del malestar. Su presencia en la sangre se puede determinar durante aproximadamente 6 semanas. Luego comienzan a desaparecer rápidamente.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

La respuesta inmune residual se caracteriza por la presencia de inmunoglobulinas de clase G (IgG) en la sangre. La aparición de estos factores en la sangre se detecta aproximadamente un mes después del inicio de la enfermedad. En el futuro, se pueden determinar durante muchos meses, años e incluso toda la vida, desempeñando una función protectora frente al regreso (recaída) de la enfermedad, y en algunos casos imposibilitando el desarrollo secundario de patología.

Si la cantidad de inmunoglobulina G comienza a aumentar nuevamente, se puede sospechar una reinfección. Se puede llegar a una conclusión similar realizando dos o tres pruebas realizadas con un intervalo de 2 semanas.

La inmunoglobulina E (IgE) se utiliza en la práctica de la parasitología. La inmunoglobulina D (IgD) se encuentra en los linfocitos B y se encuentra en bajas concentraciones en personas sanas. Después de 10 años de vida, alcanza sus valores máximos. La cantidad de inmunoglobulina D aumenta durante el embarazo, en pacientes con enfermedades sistémicas del tejido conectivo, asma bronquial y enfermedades causadas por un estado de inmunodeficiencia.

¿Cómo se realiza el ELISA de sangre?

Para el inmunoensayo enzimático, en la mayoría de los casos, se usa la sangre de los pacientes, a veces se extrae el tejido del cuerpo vítreo, el líquido del canal espinal y el líquido amniótico.

La sangre se extrae a través de una aguja de inyección en una jeringa desde la vena cubital. El estudio se realiza con el estómago vacío. Debe recordarse que tomar ciertos medicamentos puede afectar el resultado de la prueba. Antes de donar sangre, debe abstenerse de fumar, beber alcohol. La ingesta de sustancias narcóticas puede distorsionar los resultados.

En el caso de valores negativos de inmunoglobulinas IgM, IgG, IgA, podemos hablar de la ausencia de la enfermedad o de su fase inicial, y el resultado con menos es posible con una recuperación completa después de un tiempo considerable.

Si no se detectan IgA e IgM, y la IgG se manifiesta positivamente, lo más probable es que estemos hablando de la inmunidad formada después de una enfermedad infecciosa o después de la vacunación.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Si no se detectan IgA e IgM, y la IgG se manifiesta positivamente, entonces con toda probabilidad estamos hablando de la inmunidad formada después de una enfermedad infecciosa o después de la vacunación.

En el caso de un título alto de IgM con valores negativos de IgG, IgA, se puede concluir que existe una enfermedad infecciosa aguda.

Los valores positivos simultáneos de los resultados de las inmunoglobulinas: IgA, IgM, IgG son característicos de la fase aguda de recurrencia de la enfermedad crónica existente.

Para una infección crónica en fase de remisión del proceso (remisión), ELISA muestra valores negativos de inmunoglobulina M (IgM), mientras que el resultado de inmunoglobulinas G (IgG) y A (IgA) será positivo.

Inmunoensayo para parásitos por ELISA

ELISA es una abreviatura de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas para parásitos. Implica realizar pruebas médicas del sistema inmunológico de una persona. La prueba se basa en la capacidad de los anticuerpos para cambiar su color. Este método de diagnóstico tiene muchas características positivas. Por ejemplo, puede detectar una gran variedad de enfermedades causadas por infecciones. Es más eficaz en casos de enfermedades causadas por organismos parasitarios.

Lo que da la tecnología presentada: determinación de la presencia de helmintos en la sangre; buscando otros patógenos en el cuerpo; puede averiguar las razones del deterioro de su salud; el tratamiento también se basa en análisis obtenidos de esta manera; puede controlar la salud de su sistema inmunológico.

Otra buena característica es la capacidad de rastrear marcadores de cáncer, independientemente de su origen, pero sujeto a su presencia en el cuerpo, por supuesto. Esta prueba también es adecuada para describir el estado del sistema reproductor humano. La presencia de determinadas proteínas, hormonas y péptidos permite juzgar el potencial de la pareja en términos de concebir un hijo, así como la presunta calidad del futuro feto.

Un análisis de sangre para Giardia es una práctica bastante popular entre los médicos modernos. Además, este método de investigación es una excelente herramienta para el análisis biomédico y la estadística cuantitativa en términos de antígenos específicos.

¿Cómo se utiliza el método ELISA?

Sería un gran error confundir el método ELISA con el método de sondaje y posterior estudio de las heces. Estos últimos se llevan a cabo mediante métodos a nivel microscópico, cuando se toma una muestra de heces proporcionada por un paciente, o se toma de un paciente potencial directamente en una institución médica. En la muestra, intentan detectar invasiones helmínticas y otros componentes, de una forma u otra asociados a la actividad vital de los parásitos. No solo se estudian organismos parásitos microscópicos, sino también sus restos, sus huevos y larvas.

La interpretación de ELISA puede no brindarle una comprensión completa del problema, por lo que es mejor consultar a un médico o asistente de laboratorio. También es un error creer que este método es relevante solo si los helmintos parasitan en el intestino. También se diagnostican muchos otros órganos: los parásitos pueden vivir en el duodeno, las vías biliares, el hígado e incluso en el páncreas.

Es cierto que estos son casos más complejos, por lo que la calidad de dicho análisis dependerá en gran medida de los trabajadores del laboratorio que realicen las pruebas. Características de la tecnología y su diferencia con la investigación de laboratorio anterior:

  • ahora, en lugar de una muestra de heces, se usa sangre para determinar la presencia de helmintos;
  • el estudio de la muestra se lleva a cabo en el laboratorio muy rápidamente, al día siguiente puede obtener información completa;
  • el costo de la investigación de laboratorio es económico, ya que la teología es muy simple;
  • un análisis de sangre para detectar helmintos proporciona índices de precisión elevados.

La relevancia y plausibilidad de los resultados de las pruebas son directamente proporcionales a las calificaciones del personal médico, al equipo técnico del laboratorio, así como a la ausencia de negligencia o falta de atención entre los médicos. Sin embargo, incluso el asistente de laboratorio más atento y responsable experimentará enormes dificultades si el parásito está presente en el cuerpo en su población mínima, o si el embrague se realizó inmediatamente en el momento de la prueba.

Análisis inmunológico de sangre por ELISA

Pocas personas saben qué son los análisis de sangre desde el punto de vista del sistema inmunológico humano, ya que estos análisis no son tan comunes. Como regla general, dicho análisis de sangre proporciona información sobre el virus de la inmunodeficiencia en el cuerpo humano y es anónimo, ya que se lleva a cabo a petición del paciente.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Básicamente, para el análisis ELISA, el material biológico en estudio es sangre, sin embargo, se puede examinar el líquido cefalorraquídeo, el contenido del cuerpo vítreo, líquido amniótico, etc.

Para la toma de muestras, se utiliza sangre extraída de una vena con el estómago vacío, del cual se obtiene el suero para investigación por centrifugación. Además, el estudio del suero sanguíneo puede revelar una serie de enfermedades de transmisión sexual (sífilis, herpes, clamidia), así como todo tipo de hepatitis, sarampión, rubéola, paperas y toxoplasmosis.

Básicamente, para el análisis ELISA, el material biológico en estudio es sangre, sin embargo, se puede examinar el líquido cefalorraquídeo, el contenido del cuerpo vítreo, líquido amniótico, etc.

Las inmunoglobulinas son moléculas inmunes que pueden unirse y neutralizar la mayoría de los patógenos y toxinas infecciosas del cuerpo. En este caso, la característica más importante de las inmunoglobulinas es su especificidad, es decir, la capacidad de unirse a un antígeno específico. Es esta propiedad la que se utiliza para realizar un análisis de sangre para detectar inmunoglobulina.

Hay cinco tipos de inmunoglobulinas, pero las más estudiadas son las inmunoglobulinas A, M y G. Las inmunoglobulinas M y G son activas en la sangre. Las inmunoglobulinas A son una especie de barrera en la superficie de las membranas mucosas, ya que están presentes en grandes cantidades.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Un análisis de sangre inmunológico le permite determinar el tipo de inmunoglobulinas, gracias a esto, ELISA permite no solo diagnosticar la enfermedad, sino también determinar la etapa de esta y rastrear la dinámica de la enfermedad:

  • en las primeras 2 semanas de la enfermedad, solo se encuentran inmunoglobulinas A;
  • de la 2ª a la 3ª semana de la enfermedad, las inmunoglobulinas A y M se encuentran en la sangre;
  • CC3 durante 4 semanas, los tres tipos determinan un análisis de sangre para inmunoglobulina;
  • durante la recuperación, las inmunoglobulinas M desaparecen en la sangre y la cantidad de A y G disminuye de 2 a 4 veces;
  • en presencia de un proceso crónico, las inmunoglobulinas G están necesariamente presentes en la sangre, las inmunoglobulinas M están ausentes, las inmunoglobulinas A pueden estar presentes o ausentes.

Alcance del análisis de sangre inmunológico por ELISA

  • Diagnóstico de enfermedades virales: hepatitis, herpes, virus de Epstein-Barr, citomegalovirus, etc.
  • infecciones de transmisión sexual: clamidia, gonorrea, Trichomonas, mycoplasma, ureaplasma;
  • sífilis; endocrinología (determinación de niveles hormonales);
  • marcadores tumorales (diagnóstico de enfermedades oncológicas); inmunología (diagnóstico de inmunodeficiencia);
  • alergología (diagnóstico y tratamiento de alergias).

El análisis de sangre serológico es un método de análisis de sangre de laboratorio que se utiliza para diagnosticar enfermedades infecciosas y determinar la etapa del proceso infeccioso. La respuesta serológica se basa en la interacción de anticuerpos y antígenos.

La determinación de antígenos se utiliza para determinar el género y la especie de microorganismos. Este método de investigación se utiliza en urología y venereología. La sangre para un análisis de sangre serológico se toma por la mañana con el estómago vacío de una vena.

Indicaciones de cita y enfermedades detectadas por método ELISA

El biomaterial principal para ELISA es el suero sanguíneo: en el laboratorio, se toma una muestra de sangre del paciente de una vena, de la cual se extraen aún más los elementos moldeados que complican el análisis. En algunos otros casos, se utilizan para el análisis líquido cefalorraquídeo, líquido amniótico, frotis de membranas mucosas, etc.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Para evitar distorsiones en los resultados, se recomienda donar sangre en ayunas, y dos semanas antes del estudio (si el objetivo es diagnosticar enfermedades infecciosas crónicas latentes) es necesario dejar de tomar antibióticos y antivirales. Es imposible cubrir la lista completa de indicaciones de ELISA.

Los objetivos de análisis más habituales son:

  • diagnóstico de enfermedades infecciosas agudas y crónicas: IgM e IgG para hepatitis viral A, B, C, E, así como antígenos de hepatitis B y C; IgG al VIH; Ig M e IgG a la infección por citomegalovirus; Ig M e IgG al virus de Epstein-Barr; Ig M e IgG para infecciones por herpes; Ig M e IgG a la toxoplasmosis;
  • Ig M e IgG contra sarampión, rubéola, salmonelosis, disentería, encefalitis transmitida por garrapatas y otras enfermedades; IgG para enfermedades parasitarias; Ig M e IgG para infecciones de transmisión sexual; IgG a la infección por Helicobacter pylori. Evaluación general de indicadores de inmunidad humana y marcadores de algunas enfermedades autoinmunes. Identificación de marcadores oncológicos (factor de necrosis tumoral, antígeno prostático específico, antígeno cáncer-embrionario y otros). Determinación del contenido de hormonas en el suero sanguíneo (progesterona, prolactina, testosterona, hormona estimulante del tiroides y otras).

Beneficios del método ELISA

Las ventajas indiscutibles de ELISA son la alta sensibilidad y especificidad del método. La sensibilidad es la capacidad de reconocer la sustancia objetivo, incluso si su concentración en la muestra es baja. La especificidad, por otro lado, implica la precisión del diagnóstico: si el resultado es positivo, significa que se encontró exactamente el anticuerpo o antígeno que se asumió, y no algunos otros.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

ELISA reemplazó en gran medida el "estándar de oro" de la microbiología, un método de diagnóstico bacteriológico, durante el cual, para identificar el patógeno, era necesario aislarlo del cuerpo y luego cultivar el cultivo en un medio de cultivo en un tubo de ensayo durante varios días.

Todo el tiempo, mientras se realizaba el análisis, los médicos se vieron obligados a tratar al paciente "a ciegas", adivinando el origen del microorganismo por los síntomas de la enfermedad. La determinación de IgM mediante ELISA le permite hacer un diagnóstico preciso ya en los primeros días de la enfermedad.

El alto grado de fabricabilidad del inmunoensayo enzimático minimiza la influencia del factor humano, lo que reduce la probabilidad de error. La mayoría de los reactivos y kits de prueba ELISA utilizados en los laboratorios modernos se fabrican en un entorno industrial, lo que garantiza un resultado preciso.

Desventajas del método ELISA

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Desafortunadamente, para realizar ELISA, necesita saber qué buscar exactamente: la técnica de análisis implica que el médico tiene una suposición de antemano sobre la naturaleza de la enfermedad. Por lo tanto, no tiene sentido prescribir tal prueba con la esperanza de "adivinar" accidentalmente el diagnóstico.

En el caso del diagnóstico de enfermedades infecciosas, el inmunoensayo enzimático no puede encontrar el patógeno y determinar sus propiedades específicas: solo indica la presencia de anticuerpos en la sangre del paciente, indicando indirectamente la presencia de un microorganismo extraño en el cuerpo humano. ELISA es un método extremadamente preciso, pero no barato, por lo que debe usarlo con prudencia y un médico calificado debe interpretar los resultados.

Posibles resultados de ELISA

Dependiendo del contenido del análisis, el formulario puede contener datos en forma de tabla que enumere todos los anticuerpos o antígenos marcados con una reacción negativa o positiva, o se indicará el valor cuantitativo del resultado (negativo, débilmente positivo, positivo o muy positivo).

La última opción determina cuántos anticuerpos hay en la muestra analizada. Otro indicador cuantitativo es el índice de avidez de anticuerpos, expresado como porcentaje. Indica cuánto tiempo ha pasado desde el inicio del proceso infeccioso (cuanto mayor es el índice, más).

Hoy en día, se producen miles de tipos de sistemas de prueba ELISA, que permiten la detección de anticuerpos y antígenos específicos en una amplia variedad de patologías. Por lo tanto, este análisis se utiliza en casi todas las industrias médicas. El diagnóstico realizado con la ayuda de ELISA es una garantía del nombramiento de una terapia adecuada y un tratamiento eficaz de la enfermedad.

Descifrando el análisis de sangre ELISA
Descifrando el análisis de sangre ELISA

Si tiene los reactivos necesarios y una buena organización del laboratorio, recibirá el resultado de la prueba dentro de 1 a 2 días después de la extracción de sangre. En algunos casos, si se requiere una respuesta de emergencia, este período se puede reducir a 2-3 horas.

El resultado de un ELISA de alta calidad será un veredicto inequívoco: la sustancia deseada se encuentra o no se encuentra en la muestra. Si hablamos de análisis cuantitativo, entonces la concentración se puede expresar como un valor numérico o un cierto número de signos "+" (de uno a varios).

Saber más:

  • Análisis de sangre de anticuerpos: diagnóstico del sistema inmunológico
  • Análisis de sangre por inmunoensayo en parasitología

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